药学与药物研究杂志 开放获取

抽象的

新型 L-天冬酰胺酶的生物勘探和合理设计，为血癌治疗提供更好的生物药物

故事 A Costa-Silva、IM Costa、GS Agamez-Montalvo、A Pessoa 和 G Monteiro

简介：细菌产生的L-天冬酰胺酶（EC3.5.1.1）用于治疗急性淋巴细胞白血病（ALL）。然而，在ALL治疗过程中，使用细菌L-ASNase会产生无数副作用。与原核L-天冬酰胺酶治疗相关的其他缺点包括超敏反应、热稳定性低、人类蛋白酶降解和快速清除。

目的：已经使用一些技术来克服这些缺点，例如生物勘探真核生物来源或通过定点诱变对商业细菌 L-天冬酰胺酶进行修饰。为了找到 L-ASNase 的真核生物来源，本研究使用了 20 种丝状真菌，这些真菌是从水母 Olindias sambaquiensis 的微生物组中分离出来的。

结果：从水母触手（水母体内负责产生毒素的棕色结构）中分离出的 6 个真菌样品通过深层发酵工艺显示 L-天冬酰胺酶的产生。菌株 OS02 的活性最高，为 2.7 U/g。选择该菌株通过响应面中心复合设计法优化 L-天冬酰胺酶的产生。为了获得最大的酶产量（11.45 U/g），最佳条件是改良的 Czapek Dox 培养基，添加 L-天冬酰胺，并在 32.5 ˚C 和 190 rpm 下将 pH 值调整为7.4 。

结论：关于商业细菌 L-天冬酰胺酶的蛋白质工程，我们使用定点诱变来获得 L-天冬酰胺酶蛋白酶抗性：一种新的大肠杆菌 L-天冬酰胺酶 (EcAII) 变体，三重突变体。初步结果表明，突变酶在大肠杆菌 BL21 (DE3) 中表达并保留了原始 L-天冬酰胺酶活性。这些 L-天冬酰胺酶蛋白质形式可能是替代生物药物，具有进一步改善 ALL 治疗结果的潜力。