基因和蛋白质研究 开放获取

抽象的

南瓜皮蛋白酶在洗滌劑中的新應用

Vadivukkarasi S、Manikandan M Pavithra K 和 Vasudevan M

從西葫蘆皮分離純化蛋白酶，並研究其在去除血跡中的應用。這種新分離的蛋白酶的最適pH和溫度分別為7.0和40°C。以SDS PAGE測定分離的蛋白酶的分子量，發現其分子量為31KD。將此新型蛋白酶應用於沾有血跡的布料，以評估該酵素在有和沒有洗滌劑的情況下的去污能力。結果證實，新分離的蛋白酶即使在沒有去污劑的情況下也能完全去除污漬。本研究證實了南瓜皮蛋白酶在去除血跡的應用
。活性結果用於估算粗萃取物和純化蛋白酶催化的水解反應的活化能（E* = 34.2和16.2 kJ/mol）以及可逆酶解折疊各自的標準焓變（ΔH°u = 31.9）和13.9 kJ/ mol）。在殘餘活性測試中，當溫度從50℃升高到80℃時，粗蛋白水解萃取物熱失活的比速率常數從0.0072增加到0.0378min−1，而純化蛋白酶的比速率常數則從0.0099增加到0.0235min−1。這些值對應於半衰期分別從 96.3 分鐘減少到 18.3 分鐘和從 70.0 分鐘減少到 29.5 分鐘，使我們能夠估計活化能（E*d = 49.7 和 28.8 kJ/mol）、焓（ΔH*d = 47.0和26.1 kJ/mol）、熵（ΔS*d = −141.3 和−203.1 J/mol K）和吉布斯自由能（92.6 ≤ ΔG*d ≤ 96.6 kJ/mol 和91.8 ≤ ΔG*d ≤ 98.0 kJ/mol）熱失活。這些值表明，這種被證明在兩種形式下都具有高度熱穩定性的蛋白酶可以在工業應用中得到有利的利用。據我們所知，這是首次對 Aspergillus tamarii URM4634 產生的絲胺酸蛋白酶的熱力學參數進行比較研究。
蛋白酶也被稱為“消化酶”，是眾所周知的生物催化劑。 %。物質特異性
。新的潛在植物蛋白酶仍在繼續開發，以使其具有工業應用性和成本效益。在本次研究中，選擇植物 Citrus decumana L.（芸香科），因為沒有關於蛋白酶及其表徵的報告。所選植物的藥用用途已有詳細記錄：解痙、
抗發炎、抗出血、支氣管擴張、抗糖尿病、驅蟲。學和分子生物學國際會議上發表，西班牙
擴展摘要
卷。 1、伊薩。 1
2019
基因和蛋白質研究
消毒劑等。因此，本研究的目的是表徵蛋白酶並從 Citrus decumana L. 葉子中部分純化它，以期這些蛋白水解酶可以作為替代來源進行商業化。
來自嗜鹼性芽孢桿菌屬的鹼性蛋白酶。透過物理吸附和共價連接將 NPST-AK15 固定在功能化和非功能化的撥浪鼓型磁芯@介孔殼二氧化矽 (RT-MCMSS) 奈米顆粒上。然而，共價連接方法對於將 NPST-AK15 蛋白酶固定在活化的 RT-MCMSS-NH 奈米顆粒上效果更好，並用於進一步研究。與遊離蛋白酶相比，固定化酵素的最適溫度和 pH 值分別從 60 °C 變化到 65 °C，最適 pH 值從 10.5-11.0 變化。雖然遊離蛋白酶在 60°C 處理 1 小時後完全失活，但固定化酶在相似條件下仍保持其初始活性的 66.5%。固定化蛋白酶的 k cat 和 K m 分別比可溶性酶高約 1.3 倍和 1.2 倍。此外，結果表明，固定在活化的 RT-MCMSS-NH 奈米顆粒上後，NPST-AK15 蛋白酶在各種有機溶劑、界面活性劑和商業洗衣粉中的穩定性顯著提高。重要的是，固定化蛋白酶在十個連續反應循環中保持顯著的催化效率，並且使用外部磁場可以輕鬆地從反應混合物中分離。據我們所知，這是第一份關於將蛋白酶固定在撥浪鼓型磁芯@介孔殼二氧化矽奈米顆粒上的報告，該奈米顆粒也無法實現活性與穩定性的權衡。結果清楚地表明，所開發的固定化酵素系統是一種有前途的奈米生物催化劑，適用於需要蛋白酶的各種生物過程應用。