伊斯克拉·赛诺娃
开发了通过适当的内部(遗传)、表观遗传和外部刺激产生膜糖蛋白和免疫球蛋白(抗体)的实验模型。应用了低初始感染滴度(分别为高初始病毒悬浮液稀释度)的经过多次传代减毒的异源哺乳动物和哺乳动物细胞禽类病毒种疫苗株。接种了上述病毒悬浮液的哺乳动物细胞培养物亚群在加入冷冻保护剂二甲基亚砜 (DMSO) 后冷冻,随后解冻并重新孵育。此外,还从正常小鼠细胞、小鼠恶性骨髓瘤细胞和两种细胞类型的混合细胞的体外培养物中提取总裂解物。类似地,制备了大鼠脑和胰腺的总提取物(对照探针)。将单独的等分试样通过 GSH-琼脂糖柱,以选择对谷胱甘肽还原形式 - GSH 具有亲和力的分子。将来自每个解剖器官的总提取物的另一份与来自体外培养细胞的总提取物混合,该总提取物含有额外插入的大鼠肿瘤抑制基因 scgn 的拷贝,该基因编码激素样蛋白 Secretagogin (SCGN) 加 GST 标签,通过用适当的重组 DNA 载体转染。随后,将如此制备的裂解物混合物通过 GSH-琼脂糖柱以选择对 SCGN 蛋白具有亲和力的分子。通过 ELISA 估计抗神经节苷脂抗体滴度。与未接种的细胞培养物不同,病毒接种细胞中细胞密度增加和细胞单层内部“岛”的形成证明了激活融合过程对 DMSO 的影响。其中一个可能的解释可能是核苷酸(DNA 或 RNA)序列最终由于它们之间的激活融合而从病毒转移到细胞基因组。最后一种情况可能是由于 DMSO 的存在和剧烈的温度变化,以及病毒颗粒存在时膜受体糖蛋白的出现。在这里,这些数据也可以解释为在恶性细胞的影响下最终激活膜受体糖蛋白的产生。在大多数测试样本中,抗神经节苷脂抗体的滴度在统计上高于相应神经节苷脂的滴度。获得的数据证实了非髓系和非淋巴系细胞类型在适当的内部(遗传)、表观遗传和外部条件下产生膜受体糖蛋白和免疫球蛋白的能力。这种能力可以通过激活相应基因的表达或获得某些酶或细胞骨架成分的额外功能来解释。